牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的原核表达及检测

摘要：

试验旨在构建牛病毒性腹泻病毒(BVDV)E2基因原核表达载体pET-32a-E2,并在E.coli BL21(DE3)原核表达载体系统中进行表达,以获取E2蛋白,为后续BVDV诊断试剂的开发和疫苗的研制提供基础资料.本试验以一株牛病毒性腹泻病毒GSTZ为材料,利用PCR将目的基因BVDV E2基因扩增至载体pET-32a,构建重组质粒pET-32a-E2,将测序正确的阳性质粒pET-32a-E2转化表达菌E.coli BL21(DE3)诱导表达,利用Western blot对E2重组蛋白进行验证.结果表明,成功扩增出E2片段,大小约为1122bp,构建了pET-32a-E2原核表达载体;E2片段大小经双酶切鉴定与目的片段相符;SDS-PAGE电泳结果显示重组蛋白分子大小约为60 kDa,与预期值一致;Western blot鉴定表明E2蛋白成功表达.本试验成功构建了BVDV-E2基因原核表达载体pET-32a-E2,并在E.coli BL21(DE3)中得以成功表达,为后续开发BVDV诊断试剂和疫苗研制提供了基础资料.

关键词：BVDV、E2、原核表达、检测

分类号：S858.23(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2023-09-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：30-33