牛病毒性腹泻病毒RT-PCR方法的建立

摘要：

根据GenBank中登录的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)5′UTR基因序列,设计合成了1对特异性引物,建立了BVDV的RT-PCR检测方法.该方法从BVDV标准毒株NADL中扩增出了279bp的特异性片段,而对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛轮状病毒、MDBK细胞等的扩增结果均为阴性.经对标准毒株的细胞毒进行检测,其敏感度达10-1×TCID50.提取9份细胞毒总RNA后,进行一步法RT-PCR扩增可获得一致的检测结果,说明该方法重复性很好.应用该方法对45份临床疑似患牛的样品进行检测,结果检出4份阳性,表明该方法具有较好的临床应用性,且检测结果与参考实验室检测结果完全相符,可用于BVDV的快速诊断.

关键词：牛病毒性腹泻病毒、5′UTR基因、一步法RT-PCR、诊断

分类号：S858.23(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家奶牛产业技术体系科学家岗位项目CARS37-06;公益性行业农业科研专项201303040-01

在线出版日期：2018-12-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：32-35