猕猴桃溃疡病菌实时荧光定量PCR检测方法的建立和应用

摘要：

为建立猕猴桃溃疡病PSA病原菌的实时荧光定量PCR方法,根据hrpW基因设计一对引物P3F/P5R,扩增片段大小为247 bp,构建该片段的阳性质粒用于荧光定量PCR标准曲线的制作;评价引物的灵敏度、特异性,并验证其实际应用效果.结果表明,该方法能特异性地检测出PSA病原菌,灵敏度为100 fg/μL.以采集的无病症和有病症猕猴桃枝条为样品,本方法可检测到无病症枝条中最低浓度为8.45×10-5 ng/μL的PSA病原菌.本实验建立的实时荧光定量PCR检测猕猴桃溃疡病菌方法可用于猕猴桃溃疡病感病样品的早期诊断,对该病原菌的预防诊治具有重要意义.

关键词：猕猴桃溃疡病菌、实时荧光定量PCR、检测方法、应用

所属期刊栏目：46

分类号：S43;X17

资助基金：浙江省分析测试科技计划项目2015C37046;浙江省宁波市农业攻关项目2014C11005;浙江省生物工程重中之重学科自设课题ZS2016004

在线出版日期：2018-01-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

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