Western b1ot检测家兔动脉组织蛋白质表达条件的优化

摘要：

蛋白质免疫印记技术是研究和分析蛋白质的重要手段,由于其步骤繁杂、影响因素众多,常出现背景噪音高、非特异条带多、拖尾等问题,严重影响后续蛋白质定量分析.为建立最佳的检测家兔动脉组织中蛋白质表达的蛋白质免疫印记技术实验条件,以家兔动脉组织血管细胞粘附分子-1为目标蛋白,从电泳条件、抗体浓度、抗体孵育时间、温度及方法、免疫显色方法等方面进行了改良,成功建立了快速、灵敏、特异的蛋白质免疫印记技术体系;并比较了3种常用的酶免疫显色技术:3,3'-二氨基联苯胺(3,3'-diaminobenzidine,DAB)显色、增强化学发光法(enhanced chemilluminescence,ECL)X光片曝光及ECL化学发光冷却电感耦合成像系统(cooled charged-coupled device,CCD)成像的敏感性.结果表明ECL化学发光法比DAB显色法敏感性高出2～10倍,其中CCD系统敏感性高于X光片4倍,且操作简便,是最理想的检测方法.

关键词：蛋白质免疫印记技术、聚丙烯酰胺凝胶电泳、增强化学发光法、冷却电感耦合成像系统

所属期刊栏目：1

分类号：Q331;S854.4(人工选择与自然选择)

资助基金：国家自然科学基金"氟与铅对动物中枢神经谷氨酸受体通路相关蛋白表达及调控影响的研究"30871899

在线出版日期：2011-12-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：52-56