游离二氧化硅(SiO2)粉尘刺激的RAW264.7巨噬细胞源性外泌体miRNA的表达差异

摘要：

目的:探讨游离二氧化硅(sio2)粉尘刺激的RAW264.7巨噬细胞源性外泌体miRNA的表达差异.方法:以200mg/L的sio2刺激巨噬细胞48h(exo—48h组)后收集上清液,经过超速离心法提取上清中的外泌体;使用透射电镜进行扫码、纳米微粒跟踪分析技术、蛋白质印迹法鉴定外泌体;提取外泌体miRNA进行高通量测序;之后对于exo—co组与exo_48 h组外泌体miRNA表达差异进行比较.同时预测靶基因,并分析GO和KEGG.结果:经过粒径检测,结果显示其体积峰度主要集中在40～100 nm.高通量测序共得到148个差异表达的外泌体miRNA.相较于exo_control组而言,exo_48 h组存在十分明显的上调现象,其中,miR-378d、miR-5106则出现下调.靶基因预测结果、GO和KEGG分析结果显示,靶基因主要集中在TGF-β信号通路、mTOR信号通路以及Wnt信号通路等.结论:SiO2诱导的巨噬细胞所产生的外泌体内含有十分丰富的miRNA,而表达差异显著,可能参与了动脉粥样硬化等过程.

关键词：外泌体、高通量测序、巨噬细胞

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资助基金：2017年湖南省教育厅优秀青年项目科研课题,项目编号:17B274

在线出版日期：2021-01-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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