IL-33调控NF-κB/Twist信号通路促进肺泡上皮细胞上皮-间质转分化的机制研究

摘要：

目的:探究IL-33是否通过激活NF-κB/Twist信号通路,进而诱导Ⅱ型肺泡上皮细胞发生上皮-间质转分化(EMT)而促进肺纤维化(PF)的进程.方法:C57BL/6小鼠48只,随机分成对照(CON)组、博莱霉素(BLM)组、BLM+IL-33(30 μg/kg)组和BLM+抗IL-33抗体(Anti-IL-33 Ab)(100 μg/kg)组,每组12只.气管注射BLM(5 000 U/kg)诱导PF小鼠模型.造模后每隔1 d腹腔注射1次重组IL-33和抗IL-33抗体,连续注射3周.HE和Masson染色观察肺组织病理变化及胶原沉积情况.ELISA检测血浆IL-33的水平.免疫组化检测肺组织IL-33跨膜受体ST2L的表达.体外培养小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞,实验设Control组、IL-33(100 ng/ml)组、IL-33+二甲基亚砜(DMSO)组及IL-33+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC,100 μmol/L)组,每组设复孔6个.细胞先用PDTC或DMSO预处理1 h,再用IL-33处理48 h.RT-PCR检测肺组织或肺泡上皮细胞中Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、E钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA的表达.Western blot检测肺组织和(或)肺泡上皮细胞IL-33、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、E-cadherin、Vimentin、α-SMA、p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达及细胞核内NF-κB p65和Twist的蛋白水平.结果:体内实验,与CON组相比,BLM组IL-33、ST2L的表达明显升高,p-IκBα、p-NF-κB p65及核内NF-κB p65和Twist的蛋白水平显著升高,肺组织E-cadherin的表达明显下调而Vimentin、α-SMA、CollagenⅠ和Collagen Ⅲ的表达明显上调(P<0.05).与BLM组相比,IL-33组IL-33、ST2L的表达进一步升高,p-IκBα、p-NF-κB p65及核内NF-κB p65和Twist的蛋白水平进一步增加,肺组织E-cadherin的表达进一步下调而Vimentin、α-SMA、Collagen Ⅰ和Collagen Ⅲ的表达进一步上调(P<0.05),肺纤维化程度进一步加重;而Anti-IL-33 Ab的作用正好和IL-33的作用相反.体外实验,IL-33能够明显增加细胞内IκBα、NF-κB p65磷酸化水平,显著增加细胞核内NF-κB p65和Twist蛋白水平,明显下调E-cadherin的表达而显著上调Vimentin、α-SMA、Collagen Ⅰ和Collagen Ⅲ的表达(P<0.05).而IL-33的这些作用能够被NF-κB抑制剂PDTC所逆转.结论:IL-33可能通过激活NF-κB信号通路而促使转录因子Twist的表达,进而诱导Ⅱ型肺泡上皮细胞发生EMT而导致PF发生.

关键词：白细胞介素-33、核转录因子-κB、Twist、上皮-间质转分化、肺纤维化

所属期刊栏目：39

分类号：R392.12

资助基金：安徽省卫生健康委科研重点项目;安徽省高校自然科学研究重点项目;国家级大学生创新创业训练计划项目

在线出版日期：2023-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1814-1821