CD83重组蛋白的原核表达、复性纯化及多克隆抗体制备

摘要：

目的:利用原核表达系统表达、纯化CD83蛋白,制备CD83多克隆抗体.方法:构建CD83胞外结构域的原核表达质粒,利用TOP10F'菌株表达,使用IPTG诱导并寻找最佳条件;采用0.3％SKL将包涵体溶解变性,透析复性后通过GST亲和层析纯化GST-CD83蛋白;通过QuickAntibody免疫佐剂免疫SD大鼠制备CD83多克隆抗体,ELISA分析抗体的反应活性和特异性.结果:成功构建重组质粒pGEX-2T-CD83(Met1-Arg133),获得最佳诱导条件:0.2mmol/LIPTG、25℃、O/N.成功获得CD83重组蛋白,免疫大鼠后获得了特异性及活性较高且效价为1:104-1:105的多克隆抗体.结论:获得的CD83重组蛋白及多克隆抗体,为后期深入开展CD83蛋白及CD83抗体的免疫抑制特性研究提供支持.

关键词：CD83重组蛋白、原核表达、包涵体复性、多克隆抗体

所属期刊栏目：38

分类号：R392.12

资助基金：国家自然科学基金;泸州市人民政府-西南医科大学科技战略合作项目;西南医科大学自然科学基金项目;西南医科大学自然科学基金项目

在线出版日期：2023-01-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2506-2511