FGD5-AS1调控miR-133a-3p对脓毒症血管内皮细胞的细胞活性、凋亡及炎症因子表达的影响

摘要：

目的:探讨长链非编码RNA FGD5-AS1(LncRNA FGD5-AS1)对脓毒症血管内皮细胞增殖、凋亡及炎症因子表达的影响及其分子机制.方法:原代培养大鼠血管内皮细胞,10 mg/ml LPS处理细胞24 h构建脓毒症模型.采用qRT-PCR检测FGD5-AS1与微小RNA-133a-3p(miR-133a-3p)的表达水平.分别将pcDNA3.1、pcDNA3.1-FGD5-AS、pcDNA3.1-FGD5-AS1与miR-NC、pcDNA3.1-FGD5-AS1与miR-133a-3p转染至血管内皮细胞.甲基噻唑基四唑(MTT)检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;ELISA检测TNF-α、白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)水平;双荧光素酶报告实验验证FGD5-AS1与miR-133a-3p的相互作用;Western blot检测P21、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)蛋白表达量.结果:与control组相比,LPS组血管内皮细胞中FGD5-AS1的表达水平显著降低(P<0.05),细胞存活率显著降低(P<0.05),miR-133a-3p的表达水平显著升高(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),P21、Caspase-3蛋白水平显著升高(P<0.05),TNF-α、IL-1、IL-6水平显著升高(P<0.05);与LPS+pcDNA3.1组相比,LPS+pcDNA3.1-FGD5-AS组血管内皮细胞存活率显著升高(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.05),P21、Caspase-3蛋白水平显著降低(P<0.05),TNF-α、IL-1、IL-6水平显著降低(P<0.05);miR-133a-3p过表达可抑制野生型质粒WT-FGD5-AS1细胞的荧光素酶活性,且FGD5-AS1可负向调控miR-133a-3p的表达(P<0.05);miR-133a-3p过表达可逆转FGD5-AS1过表达对LPS诱导的血管内皮细胞增殖、凋亡及炎症因子表达的影响.结论:LncRNA FGD5-AS1靶向调控miR-133a-3p抑制LPS诱导的血管内皮细胞凋亡及炎症反应,促进细胞存活.

关键词：LncRNA FGD5-AS1;miR-133a-3p;脓毒症;血管内皮细胞;凋亡;炎症因子

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分类号：R459.7(治疗学)

在线出版日期：2021-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2076-2081