安石榴苷通过miR-132-5p/TRAF6途径调控oxLDL诱导的血管平滑肌细胞损伤的分子机制

摘要：

目的:探讨安石榴苷(PUN)对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的血管平滑肌细胞凋亡、炎症反应的影响及分子机制.方法:oxLDL诱导人主动脉血管平滑肌细胞建立动脉粥样硬化模型,不同浓度(5、10、20μg/ml)的PUN处理oxLDL诱导的血管平滑肌细胞.ELISA检测IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.流式细胞术检测PUN对细胞凋亡能力的影响;qRT-PCR与Western blot分别检测PUN对微小RNA-132-5p(miR-132-5p)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)表达水平的影响.双荧光素酶报告实验与Western blot实验验证miR-132-5p与TRAF6的靶向关系.观察miR-132-5p过表达或抑制miR-132-5p表达对oxLDL诱导的血管平滑肌细胞损伤的影响.Western blot检测凋亡标记蛋白B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的表达情况.结果:与Con组相比,oxLDL组促炎因子IL-1β、TNF-α水平明显升高(P<0.05);与oxLDL组相比,PUN不同剂量组IL-1β、TNF-α水平明显降低(P<0.05);oxLDL组细胞凋亡率明显高于Con组(P<0.05),PUN不同剂量组细胞凋亡率明显低于oxLDL组(P<0.05);与Con组相比,oxLDL组Bax、TRAF6的表达水平显著升高(P<0.05),Bcl-2、miR-132-5p的表达水平显著降低(P<0.05);与oxLDL组相比,PUN不同剂量组Bax、TRAF6的表达水平显著降低(P<0.05),Bcl-2、miR-132-5p的表达水平显著升高(P<0.05);miR-132-5p可抑制野生型载体TRAF6细胞的荧光素酶活性,且miR-132-5p可负向调控TRAF6的表达(P<0.05);miR-132-5p过表达后IL-1β、TNF-α水平明显降低(P<0.05),细胞凋亡率明显降低(P<0.05),Bax的表达水平显著降低(P<0.05),Bcl-2的表达水平显著升高(P<0.05);抑制miR-132-5p的表达可逆转PUN对oxLDL诱导的血管平滑肌细胞损伤的作用.结论:PUN可通过调控miR-132-5p/TRAF6分子轴发挥抗炎作用及抑制血管平滑肌细胞凋亡.

关键词：安石榴苷、miR-132-5p、TRAF6、动脉粥样硬化、凋亡、抗炎

所属期刊栏目：37

分类号：R543.5(心脏、血管（循环系）疾病)

在线出版日期：2021-03-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：282-288