抗人载脂蛋白6单链抗体的筛选、制备及活性鉴定

摘要：

目的:筛选特异性抗人载脂蛋白6单链抗体(anti-hLCN6 scFv),并进行表达纯化和活性鉴定.方法:采用RT-PCR技术,用抗体可变区简并引物,从hLCN6免疫小鼠的淋巴细胞中扩增全套VH和VL基因,装配成scFv基因后将其克隆到噬菌体载体pFAB5C中,构建scFv噬菌体抗体库.对抗体库进行4轮富集,筛选抗hLCN6阳性scFv.经原核表达纯化后,用Western blot和间接ELISA对其活性进行鉴定.结果:筛选到2株亲和力较高的阳性克隆,测序表明其序列一致.获得了高纯度的scFv抗体,其对抗原具有良好的亲和力和特异性.结论:成功筛选到特异性抗hLCN6 scFv,为利用该抗体进行混合斑中的精子分离奠定了基础.

关键词：噬菌体展示、人载脂蛋白6、单链抗体

所属期刊栏目：36

分类号：R392.11

资助基金：本文为国家自然科学基金 No. 81501634 和河南省高等学校重点科研项目No. 15A340001

在线出版日期：2020-06-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1224-1228