10.3969/j.issn.1000-484X.2020.10.004
卡他莫拉菌经NADPH氧化酶/ROS/TGF-α信号通路诱导支气管上皮细胞表达MUC5AC
目的:初步探究卡他莫拉菌诱导支气管上皮细胞表达MUC5AC的分子机制,为阐明卡他莫拉菌的致病机制提供理论依据.方法:培养人正常支气管上皮细胞(BEAS-2B),采用不同感染复数(MOI=0.001、0.01、0.1)的卡他莫拉菌感染BEAS-2B细胞后,ELISA、qPCR分别检测细胞中TGF-α 及MUC5AC含量,DCFH-DA法检测细胞内ROS水平,并通过Western blot检测细胞质及细胞膜上NADPH氧化酶p47 phox的表达情况;ROS抑制剂NAC以及NADPH氧化酶抑制剂Apocynin预处理感染细胞后,分别检测细胞中MUC5AC、ROS及TGF-α水平;通过TGF-α中和抗体处理卡他莫拉菌感染的细胞,并检测细胞内MUC5AC的变化情况.最后采用ELISA检测卡他莫拉菌感染患者血清以及肺泡灌洗液中TGF-α以及MUC5AC分泌水平.结果:不同感染复数卡他莫拉菌感染细胞后能够显著诱导MUC5AC表达,且呈浓度依赖性;此外,在卡他莫拉菌感染的细胞内,ROS及TGF-α水平显著上升,细胞质内p47 phox表达降低而细胞膜上p47 phox表达则显著上升;ROS抑制剂及NADPH氧化酶抑制剂处理后,细胞中ROS、MUC5AC及TGF-α水平均明显减少;而采用TGF-α中和抗体处理也能够明显减少感染细胞内MUC5AC的分泌.此外,卡他莫拉菌感染患者血清以及肺泡灌洗液中TGF-α和MUC5AC分泌水平均显著高于正常组.结论:卡他莫拉菌能够通过激活NADPH氧化酶/ROS/TGF-α信号通路促进人支气管上皮细胞分泌MUC5AC.
卡他莫拉菌、MUC5AC、NADPH氧化酶、活性氧
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R392.1
本文受湖南省卫生计生委科技计划项目B2017060
2020-06-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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