miR-612对肝细胞癌干细胞特性影响及机制研究

摘要：

目的:探讨miR-612对肝细胞癌(HCC)干细胞特性的影响并探讨其机制.方法:采用实时定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-612在HCC细胞系和正常肝细胞系中的表达;用脂质体将miR-612 mimic/对照转染至HepG2细胞中,采用细胞肿瘤球形成和软琼脂克隆形成实验检测miR-612对HepG2细胞干性的影响;qRT-PCR及蛋白免疫印迹试验(Western blot)检测HepG2细胞中CD133、Nanog的mRNA和蛋白表达水平.用荧光素酶报告基因试验检测miR-612对Nanog基因的直接调控作用.结果:qRT-PCR结果显示miR-612在LM3、HepG2、Hep3B HCC细胞中相对表达量分别为2.00±0.10、1.01±0.06、1.51±0.05,显著低于在肝正常细胞LO2中的相对表达量5.23±0.43(P值均<0.05);HepG2转染miR-612 mimic后,细胞悬浮肿瘤球形成和软琼脂克隆球形成的数目均显著减少(P值均<0.05),细胞中CD133、Nanog的mRNA和蛋白表达均减少(P值均<0.05).双荧光素酶报道基因结果显示miR-612可以特异性直接靶向作用于Nanog基因.结论:在HCC HepG2细胞中,高表达miR-612能够抑制细胞干性表达,可能是通过下调Nanog基因表达实现的.

关键词：miR-612、肝细胞癌、干性、Nanog、CD133

所属期刊栏目：36

分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：本文受江西省卫生厅科技计划项目No. 20155421

在线出版日期：2020-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：174-179