鼠伤寒沙门菌sseK3基因缺失株的构建及其生物学特性研究

摘要：

目的:检测sseK3基因的缺失对鼠伤寒沙门菌生物学特性的影响,为探究该基因的功能及开发安全有效的鼠伤寒沙门菌活疫苗提供了新思路.方法:通过重组自杀性质粒介导,两步筛选法敲除sseK3基因并成功构建缺失菌株的回复菌株,进而检测其生物学和免疫学特性.结果:PCR、双酶切及测序结果证实成功构建了sseK3缺失株及其回复菌株.生物学特性研究表明,sseK3缺失菌株和亲本株SL1344血清型均为1,4,5,12:i:1,2,生化特性和生长速度无明显差异,且sseK3缺失株能够稳定遗传;sseK3缺失株口服感染6周龄BALB/c小鼠的LD50为2.96×108 CFU,与亲本菌株SL1344相比,sseK3缺失株的LD50值升高约1035倍,毒力显著下降;免疫保护效力实验显示:sseK3缺失株免疫后第17天保护率为66.7％;在免疫小鼠后的第14天血清IgG达到最高水平;回复菌株与亲本亲株生物学特性无显著性差异,基本回复到野生型水平.结论:成功构建了鼠伤寒沙门菌sseK3基因缺失株,可稳定遗传,毒力显著降低,具有良好的免疫原性,推测sseK3对鼠伤寒沙门菌的毒力具有重要的调节作用,为探究该基因的功能及将其开发为更加安全有效的沙门菌弱毒疫苗候选菌株奠定了基础.

关键词：鼠伤寒沙门菌SL1344、sseK3基因、缺失株、回复菌株、生物学特性

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分类号：S852.612(动物医学（兽医学）)

资助基金：河南省自然科学基金项目182300410078;国家自然科学基金项目31572489和31802159;河南省科技攻关项目182102110061;河南科技大学博士启动基金项目13480071

在线出版日期：2019-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2375-2380