微小RNA-600在卵巢癌组织的表达及其靶向调控对氧磷酶3对卵巢癌细胞株OVCAR-3侵袭和迁移的影响

摘要：

目的:探讨微小RNA(miRNA)-600在卵巢癌组织及细胞系的表达及其靶向调控对氧磷酶3对卵巢癌细胞株OVCAR-3侵袭和迁移的机制.方法:收集2017年1月至2018年10月我院妇产科经手术治疗的卵巢癌患者共50例.使用Lipofectamine 2000将miRNA-600模拟物、miRNA-600抑制剂、模拟物与抑制剂对照物、对氧磷酶3(PON3)及其对照载体等转染到卵巢癌细胞.实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miRNA-600和PON3基因相对表达量.蛋白印迹检测法(WB)检测PON3及侵袭和迁移相关分子E-钙黏素、N-钙黏素、MMP-2、MMP-9的蛋白分子水平.应用划痕试验和Transwell实验分别测定细胞迁移和侵袭能力.免疫组织化学法检测组织中PON3、E-钙黏素、N-钙黏素、MMP-2、MMP-9的水平.结果:与癌旁组织(6.11±1.15)相比,癌组织(3.81±0.69)中miRNA-600的相对表达量显著降低(t=7.139,P<0.05).与模拟物对照[miRNA-600:2.13±0.18;N-钙黏素:4.78±0.69;E-钙黏素:2.07±0.24;MMP-2:5.16±0.73;MMP-9:4.44±0.62;迁移率:(73.45±5.18)％;细胞侵袭数量:47.22±6.90]相比,miRNA-600模拟物[miRNA-600:7.88±0.69;N-钙黏素:2.21±0.45;E-钙黏素:4.67±0.20;MMP-2:2.04±0.12;MMP-9:2.39±0.20;迁移率:(37.63±3.76)％;细胞侵袭数量:19.34±4.63]的miRNA-600与E-钙黏素显著增高,而N-钙黏素、MMP-2、MMP-9、迁移率和细胞侵袭数量显著降低(P<0.05);与抑制剂对照[miRNA-600:2.15±0.19;N-钙黏素:1.89±0.22;E-钙黏素:4.92±0.42;MMP-2:1.76±0.09;MMP-9:1.88±0.12;迁移率:(41.45±3.97)％;细胞侵袭数量:41.56±7.98]相比,miRNA-600抑制剂[miRNA-600:0.26±0.08;N-钙黏素:4.67±0.60;E-钙黏素:1.85±0.07;MMP-2:4.38±0.57;MMP-9:4.55±0.60;迁移率:(84.12±6.50)％;细胞侵袭数量:62.89±9.57]的miRNA-600与E-钙黏素显著降低,而N-钙黏素、MMP-2、MMP-9、迁移率和细胞侵袭数量显著增高(P<0.05).与模拟物对照[迁移率:(46.45±3.88)％;细胞侵袭数量:49.76±4.26]相比,miRNA-600模拟物[迁移率:(22.09±1.68)％;细胞侵袭数量:26.17±3.40]的OVCAR-3细胞迁移率和细胞侵袭数量均显著降低(P<0.05),PON3载体[迁移率:(92.11±6.05)％;细胞侵袭数量:77.04±7.64]的OVCAR-3细胞迁移率和细胞侵袭数量均显著增高(P<0.05),而miRNA-600模拟物联合PON3载体[迁移率:(55.09±4.16)％;细胞侵袭数量:52.36±5.37]OVCAR-3细胞迁移率和细胞侵袭数量差异无统计学意义(P<0.05).与模拟物对照[结节重量:(2.76±0.22)g;结节数量:13.45±2.54]相比,miRNA-600模拟物[结节重量(0.69±0.08)g;结节数量:4.19±0.63]处理的裸鼠腹腔内肿瘤转移结节重量和数量均显著降低(P<0.05).免疫组织化学染色结果显示,与模拟物对照(9.76±0.91)相比,miRNA-600模拟物(1.84±0.16)处理的裸鼠结节中PON3的免疫组织化学评分显著降低(P<0.05).结论:miRNA-600可抑制卵巢癌OVCAR-3细胞迁移与侵袭能力,其机制与调控靶基因PON3密切相关.

关键词：卵巢癌、微小RNA、迁移、侵袭、对氧磷酶3

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分类号：R737.31(肿瘤学)

资助基金：贵州省教育厅计划项目KY2017045

在线出版日期：2019-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2357-2361,2368