hsa-miR-448过表达下调HIF-1α对结肠癌细胞SW480作用及机制研究

摘要：

目的:本研究旨在探讨小RNA-448(miR-448)在结肠癌发生和发展中的作用及其潜在的分子机制.方法:先用基因预测软件:miRanda、TarBase和TargetScan预测miR-448的靶基因,并用荧光素实验验证靶向关系;然后miR-448 mimic与pcDNA-HIF-1α单独或联合转染SW480细胞,并用RT-PCR检测miR-448和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达,Transwell检测细胞侵袭情况,划痕实验检测细胞的迁移能力,蛋白印迹检测HIF-1α、E-cadherin、Vimentin、N-cadherin;P38和Hsp27的蛋白表达;miR-448 inhibitor转染结肠癌细胞SW480、10μmol/L SB203580处理结肠癌细胞SW480单独或联合进行,RT-PCR检测miR-448的表达,蛋白印迹检测HIF-1α、P38和Hsp27的表达,Transwell检测细胞侵袭;裸鼠皮下注射miR-448 mimic转染结肠癌细胞SW480,检测30 d时移植瘤重量,RT-PCR检测miR-448和HIF-1α的表达,免疫组化检测Vimentin的表达,蛋白印迹法检测P38和Hsp27的表达.结果:miR-448与HIF-1α在3'UTR区存在结合位点,miR-448和HIF-1α存在靶向关系,并且miR-448对HIF-1α表达具有抑制作用;SW480细胞过表达miR-448后,HIF-1α表达量下调,细胞侵袭和迁移速度减慢,E-cadherin的表达显著上调,而N-cadherin和Vimentin的表达显著下调;低表达miR-448后,HIF-1α、P38和Hsp27表达量显著增加,细胞侵袭数目显著增多;小鼠转染MIR-448 mimic后,移植瘤重量显著减轻,miR-448表达量显著上调,HIF-1α表达量显著下调,Vimentin阳性比率明显降低,P38和Hsp27表达量显著下调.结论:在结肠癌细胞SW480中,过表达hsa-miR-448下调HIF-1α来减弱细胞的侵袭迁移能力以及抑制上皮间质转化,从而抑制结肠癌的发生和发展.

关键词：miR-448、HIF-1α、结肠癌、侵袭、迁移、EMT

所属期刊栏目：35

分类号：R734.2(肿瘤学)

资助基金：河南省自然科学基金面上项目162300410220

在线出版日期：2019-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：2350-2356