10.3969/j.issn.1000-484X.2019.06.013
抗人PD-L1单克隆抗体制备及其在肿瘤病理诊断中的意义
目的:研制用于肿瘤临床诊断的高亲和力、高特异性的抗人PD-L1单克隆抗体.方法:用重组人PD-L1胞外段蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术和间接ELISA筛选,鉴定获得可稳定分泌抗人PD-L1单克隆抗体的杂交瘤细胞株;通过SDS-PAGE、间接ELISA等方法鉴定其亲和力、效价、纯度及亚型;用Western blot检测肿瘤细胞(OV2008、C13等);用免疫组化(ICH)检测膀胱癌、黑色素瘤肿瘤组织芯片病理组织的PD-L1表达水平.结果:共获得4株单克隆抗体,其中Ab3亲和力高、特异性强,其效价和亲和常数分别为4.1 ng/ml、7.85×109M-1,与PD-L2无交叉反应,可识别肿瘤细胞中的天然PD-L1;ICH结果表明,Ab3抗体能特异性检测出膀胱癌和黑色素瘤组织中PD-L1表达水平的高、中、低.结论:获得一株可分泌高亲和力、高特异性的抗人PD-L1单抗的杂交瘤细胞株,可用于膀胱癌和黑色素瘤组织的PD-L1表达水平的检测.
单克隆抗体、PD-L1、Western blot、免疫组化、肿瘤分子诊断
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R730.45(肿瘤学)
高等学校学科创新引智计划111计划项目B16021
2019-04-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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