重组法国梧桐花粉过敏原2(rPla a2)对诱导型一氧化氮合酶(NOS2)基因启动子活性及基因表达的影响

摘要：

目的:构建人诱导型一氧化氮合酶(NOS2)基因启动子区,对NOS2启动子序列进行鉴定并分析其活性;探索重组法国梧桐花粉过敏原2(rPla a2)对人NOS2基因启动子活性及基因表达的影响.方法:利用PCR扩增、限制性内切酶双酶切、DNA连接酶连接、大肠杆菌转化等方法将NOS2基因启动子区克隆至pGL3-Basic载体上,将所构建重组报告质粒转染至人胚肾(HEK293T)细胞中,利用双荧光素酶活性分析检测该重组报告质粒启动子活性及检测rPla a2对人NOS2基因启动子活性的影响;用实时荧光定量PCR法检测rPla a2对人NOS2基因mRNA水平的影响.结果:成功构建含有NOS2启动子的重组报告质粒,与对照(pGL3-Basic)组相比,含NOS2启动子区的重组质粒转染组荧光素酶活性显著增高;与不加刺激(NOS2)组相比,加入rPla a2刺激后含NOS2启动子区的重组报告质粒转染组荧光素酶活性显著增高,加入rPla a2刺激后NOS2 mRNA相对表达水平显著增高.结论:rPla a2可增强人NOS2基因启动子活性,并增加其基因表达.

关键词：诱导型一氧化氮合酶(NOS2)、重组法国梧桐花粉过敏原2(rPlaa2)、启动子、哮喘

所属期刊栏目：34

分类号：R392.8;R562

资助基金：国家自然科学基金81500013;南京市科技计划项目201503003

在线出版日期：2018-09-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1143-1147