T-exo 负载DC诱导抗肝癌细胞免疫效应研究

摘要：

目的：观察肝癌细胞来源的外泌体（T-exo）负载DC体外诱导细胞毒T细胞（CTL）对肝癌细胞的杀伤作用。方法：采用超滤离心技术联合蔗糖密度梯度超速离心的方法从肝癌Huh-7细胞培养上清液中分离外泌体（ T-exo ），透射电镜鉴定形态，Western blot 检测外泌体相关蛋白CD9、CD63、HSP70及肿瘤抗原分子AFP的表达；分离健康供者外周血单个核细胞（PBMC）培养DC，流式细胞术鉴定负载T-exo 的DC细胞表型；用2-（4-碘苯）-3-（4硝基苯）-5-（2，4-磺苯基四氮唑）-2H-四唑单钠盐-1（ WST-1）法检测负载T-exo 的DC 刺激T淋巴细胞增殖情况；流式细胞术Annexin-V／PI双染法检测负载T-exo 的DC诱导CTL分别对AFP阳性Huh-7细胞及AFP阴性的SMMC7721细胞的杀伤作用。结果：透射电镜下可见T-exo为圆形或椭圆形双层膜囊泡状小体，大小不等，平均直径50～100 nm，表达外泌体膜相关分子及肿瘤抗原分子。负载T-exo 的DC 可促进初始T细胞增殖，T-exo致敏DC对AFP阳性的Huh-7肝癌细胞系杀伤活性明显高于AFP阴性的SMMC7721肝癌细胞组（ P＜0.05）及未负载T-exo 的对照组DC（ P＜0.05）。结论：负载T-exo 的DC 能促进T细胞增殖，提高CTL细胞的细胞毒活性诱导特异性的抗肝癌效应。经T-exo抗原致敏DC诱导的CTL对肝癌细胞有明显的细胞毒作用，明显高于DC对照组（ P＜0.05）。

关键词：树突状细胞、外泌体、肝癌、细胞毒T细胞

所属期刊栏目：32

分类号：R392.12

资助基金：厦门大学药学院－福建省肿瘤医院促进科技合作联合研究基金2014LY-2L-04;国家临床重点专科建设项目资助。

在线出版日期：2016-05-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：519-523