10.3969/j.issn.1000-484X.2016.04.013
HSPC238对HMOX1、RPS27a、MT2A、UBB调节的初步研究
目的:探讨HSPC238过表达或低表达对目标蛋白(HMOX1、MT2A、UBB、RPS27a)的调节作用及其调节途径。方法:分别构建HSPC238的干扰载体及高表达载体,脂质体法转染HEPG2细胞株,RT-PCR、Western blot检测HSPC238及目标蛋白的mRNA、蛋白的表达量;进一步用目标蛋白的高表达质粒分别转染低表达及高表达HSPC238的HEPG2细胞株,实验组另以蛋白酶体抑制剂MG132处理细胞,镍柱纯化目标蛋白,以HSPC238做免疫印迹,检测目标蛋白累积情况。结果:外源性干扰HSPC238后HMOX1、MT2A、RPS27a表达下调较明显,外源性过表达HSPC238后MT2A、UBB、RPS27a表达水平明显上调;目标蛋白的高表达质粒分别转染低表达及高表达HSPC238的HEPG2细胞株,实验组以蛋白酶体抑制剂MG132处理细胞后,与对照组比较,泛素化的目标蛋白条带明显增加。结论:过表达 HSPC238可上调 MT2A、UBB、RPS27a 的表达,干扰HSPC238可下调HMOX1、MT2A、RPS27a的表达;HSPC238可能通过泛素蛋白酶体途径( Ubiquitin-proteasome pathway ,UPP)对目标蛋白发挥调节作用。
HSPC238、泛素蛋白酶体途径、目标蛋白
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R392.1
国家自然科学基金81101534;广东省自然科学基金S2012010010824;广东省医学科研基金A2013875项目资助。
2016-05-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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