结核杆菌Pup－蛋白酶体系统与结核杆菌持留性的相关性研究

摘要：

目的：本研究通过诱导结核杆菌在低氧环境中进入持留状态，比较分析不同时间点、不同环境下结核杆菌Pup、Dop、PafA和Mpa 基因的表达水平差异，探讨研究Pup－蛋白酶体系统对结核杆菌持留性的调控作用。方法：本实验以结核杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株（以下简称为H37Rv菌株）为研究对象，在低氧、有氧环境下进行培养，分别提取不同时间点每组样本菌株的总RNA，并进行纯度鉴定。运用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR的方法，分别检测各组结核杆菌菌株的Pup、Dop、PafA和Mpa 基因的表达；比较分析不同时间点、不同环境下的各结核杆菌菌株Pup、Dop、PafA和Mpa基因的表达水平差异。结果：在不同时间点对低氧环境下菌株Pup、Dop、PafA和Mpa的表达水平进行检测，Pup、Dop、PafA和Mpa基因的相对表达水平：低氧环境下，与0 d比较，Pup基因在4 d、7 d、10 d分别上调1．66、2．43、2．76倍，Dop基因在2 d、4 d、7 d、10 d分别上调1．38、1．91、2．54、3．28倍，PafA基因在2 d、4 d、7 d、10 d分别上调1．22、1．75、2．37、2．67倍，Mpa 基因在4 d、7 d、10 d分别上调1．66、2．21、2．63倍（ P＜0．05）；以有氧环境组做对照，低氧环境下，相同时间点，Pup 基因在4 d、7 d、10 d分别上调1．85、2．81、2．93倍，Dop基因在2 d、4 d、7 d、10 d分别上调1．20、1．76、2．01、3．01倍，PafA基因在2 d、4 d、7 d、10 d分别上调1．22、1．57、2．29、2．29倍，Mpa 基因在2 d、4 d、7 d、10 d分别上调1．16、1．58、2．16、2．69倍（ P＜0．05）。结论：低氧环境下，不同时间点，Pup、Dop、PafA和Mpa 基因的相对表达量存在差异；以有氧环境组作对照，相同时间点，低氧环境下与有氧环境下Pup、Dop、PafA和Mpa 基因的相对表达量也存在差异。 Pup－蛋白酶体系统对结核杆菌持留性具有一定的调控作用。

关键词：结核杆菌、Pup-蛋白酶体系统、持留性

分类号：R378.91(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81260261，81160192;新疆生产建设兵团医药专项资金资助项目2012BA022;石河子大学高层次人才科研启动项目No．RCZX201446。

在线出版日期：2015-05-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：447-452