10.3969/j.issn.1000-484X.2014.01.016
抗沙眼衣原体MIP蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定
目的:制备小鼠抗沙眼衣原体MIP蛋白单克隆抗体并鉴定其生物学特性.方法:重组MIP蛋白免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行常规融合,间接ELISA法筛选阳性克隆并进行有限稀释克隆化,建立分泌抗MIP蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,进一步采用ELISA法鉴定单克隆抗体的效价、类别及抗MIP蛋白特异性,IFA法鉴定单克隆抗体的衣原体种属特异性及中和能力.结果:建立了2株能稳定分泌抗MIP蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1R6H6、2L9D2),ELISA法测得培养上清效价均为1:1 600,免疫球蛋白类型分别为IgG2a和IgG1;2株单克隆抗体不仅能特异性的识别MIP重组蛋白,而且能特异性识别沙眼衣原体血清型A、D、L2所编码的内源性MIP蛋白,但不识别其他衣原体优势蛋白及MoPn、AR39和6BC;体外中和试验表明,2株单克隆抗体均能有效中和衣原体的感染性.结论:获得了有活性的能特异性识别MIP蛋白的单克隆抗体,为深入研究MIP蛋白的结构和功能奠定了基础.
沙眼衣原体、MIP蛋白、单克隆抗体、鉴定
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R392.7
国家自然科学基金81202374;湖南省自然科学基金12JJ3113;湖南省高校科技创新团队湘教通[2010]212号等基金
2014-03-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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