基于独特型-抗独特型初步建立玉米赤霉烯酮无毒ELISA定量检测技术

摘要：

目的:初步建立以玉米赤霉烯酮(ZEN)抗独特型单抗替代玉米赤霉烯酮标准品,检测ZEN残留的无毒ELISA定量检测技术.方法:以ZEN-BSA为包被原,ZEN单抗(1G4)为反应抗体,分别以不同浓度的ZEN毒素或ZEN抗独特型单抗1D5(Ab2β-1D5)为竞争物,建立竞争抑制曲线.根据抑制率在20%～80%间,在相同抑制率条件下,ZEN与1D5间浓度对应关系,绘制替代标准曲线及对应的浓度转换方程.以ZEN类似毒素代替ZEN作为竞争抗原,检验方法的特异性;板内、板间试验检验方法的精密度.结果:初步建立了ZEN无毒ELISA定量检测技术,1D5与ZEN毒素之间的替代标准曲线方程为:y=1.2846x1.9310(y为ZEN毒素浓度ng/ml,x为抗独特型抗体浓度(μg/ml).检出限(IC20)为1.041 ng/ml,检测范围为1.041～25.99 ng/ml.方法的批内平均变异系数为3.88%,批间平均变异系数为4.96%.方法特异性好,与ZEN类似毒素几乎无交叉反应.结论:利用ZEN单抗和ZEN抗独特型单抗初步建立了ZEN的无毒ELISA定量检测方法.

关键词：玉米赤霉烯酮、单克隆抗体、抗独特型单抗、无毒ELISA检测法

所属期刊栏目：29

分类号：R392.11

资助基金：天河区科技计划项目108ZH044;暨南大学创新基金11610312

在线出版日期：2014-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1317-1321