β2糖蛋白Ⅰ单克隆抗体的制备与鉴定

摘要：

目的:制备β2糖蛋白Ⅰ(β2GPⅠ)单克隆抗体(MAbs),并鉴定抗体的特性.方法:以纯化的人血浆β2GP Ⅰ免疫BALB/c小鼠,采用PEG融合技术,间接ELISA法和有限稀释法,制备和筛选杂交瘤细胞.杂交瘤细胞继续扩大培养后注入BALB/c小鼠腹腔制备腹水,经硫酸铵沉淀及Protein G纯化MAbs.秋水仙素阻抑法鉴定杂交瘤细胞株染色体数目,ELISA测定滴度,Ig亚类试剂盒鉴定Ig亚类,Western blot鉴定特异性.结果:获得1株稳定分泌MAbs的杂交瘤细胞株β2,该杂交瘤细胞株的染色体数为99 ～108.进一步研究发现,其培养液和腹水滴度为1∶29和1∶215,其MAbs分类为IgG1/κ,Western blot 显示纯化的MAbs及标准anti-β2GP Ⅰ与β2GP Ⅰ均有反应条带,具有较好的特异性.结论:成功获得并纯化β2GP Ⅰ单克隆抗体,为进一步研究β2GP Ⅰ/anti-β2GP Ⅰ复合物在抗磷脂综合征中的作用奠定了基础.

关键词：β2GP Ⅰ、杂交瘤细胞株、单克隆抗体、抗磷脂综合征

所属期刊栏目：29

分类号：R593.2(全身性疾病)

资助基金：国家自然科学基金项目30971301

在线出版日期：2013-08-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：649-652