10.3969/j.issn.1000-484X.2013.03.009
宫颈癌HeLa细胞内HPV L1蛋白表达的观察
目的:通过观察电镜下所见的人宫颈癌细胞株——HeLa细胞胞质内包涵体类物质的性质,了解人乳头瘤病毒(HPV)阳性宫颈癌细胞内HPV主要外壳蛋白(L1)的表达规律.方法:培养HeLa细胞,采用ELISA、光镜和电镜的免疫组织化学、Western blot方法,以HPV18 L1小鼠单克隆抗体对细胞内L1的表达情况进行检测,同时用反转录PCR方法检测细胞内L1 mRNA的存在.结果:ELISA检测显示,HeLa细胞裂解液内有HPV L1的存在.HRP标记的光镜免疫组织化学显示,培养的HeLa细胞呈现强的HPV L1阳性反应.电镜下观察,可见部分培养的HeLa细胞胞质内有团块状包涵体样物质,这些团块由大小均匀的颗粒样物质密集而成.这些颗粒性物质可为HPV L1抗体携带的胶体金颗粒标记.Western blot检测结果显示,HeLa细胞裂解液在56 kD区域,出现了一条L1特异阳性条带,说明HeLa细胞内有HPV18 L1的存在.反向PCR方法检测显示细胞内有L1 mRNA的存在.结论:电镜下所见到的培养的宫颈癌细胞株HeLa细胞胞质内的包涵体类物质,系由HPV18 L1构成,说明HeLa细胞能够表达L1.
HeLa细胞、人乳头瘤病毒、宫颈癌、主要外壳蛋白、表达
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R730.21;R737.33;R361.3(肿瘤学)
国家自然科学基金资助项目30770104;湖北省自然科学基金资助项目2011CDC002
2013-06-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
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