人IL-12/慢病毒重组体对结肠癌干细胞“干性”的影响

摘要：

目的:构建并鉴定人白介素12(Interleukin-12,IL-12)-慢病毒过表达重组体,观察其在结肠癌干细胞(Cancer stem cell,CSCs)中的表达及其作用,为后续动物试验做准备.方法:PCR扩增pORF-hIL-12质粒获得IL-12基因,通过双酶切及连接后构建IL-12/慢病毒过表达重组体；分离鉴定结肠CSCs,将IL-12/慢病毒过表达重组体转染结肠CSCs建立IL-12过表达模型,检测IL-12在结肠CSCs的表达及对结肠CSCs“干性”的影响.结果:PCR、酶切鉴定及测序证实IL-12/慢病毒过表达重组体构建正确,流式细胞仪成功分选出CD133+CD44+ SW480结肠CSCs,IL-12/慢病毒转染结肠CSCs后,RT-PCR及Western blot证实结肠CSCs培养上清均有IL-12表达,IL-12抑制结肠CSCs自我更新,促进其分化.结论:IL-12/慢病毒过表达重组体能在结肠CSCs中稳定表达并能抑制结肠CSCs自我更新及分化.

关键词：人白介素12重组体、构建、癌症干细胞、表达、干性

所属期刊栏目：29

分类号：R730.73(肿瘤学)

资助基金：重庆市博士后日常经费资助渝RC2011036

在线出版日期：2013-04-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：161-167