10.3969/j.issn.1000-484X.2012.08.002
Rab7负向调控巨噬细胞中CpG诱导的细胞因子的表达
目的:研究Rab7过表达及失活突变(Rab7T22N)对CpG刺激的RAW264.7巨噬细胞中分泌细胞因子的影响.方法:采用RT-PCR和Real-time PCR检测RAW264.7细胞中Rab7在CpG刺激下表达模式.将Rab7真核表达质粒及失活突变质粒Rab7T22N 通过脂质体法转染RAW264.7细胞,G418稳定筛选,Western法鉴定表达效果.用CpG刺激稳定表达Rab7的RAW264.7细胞系,RT-PCR和Real-time PCR检测细胞因子IL-6、IL-1β、IFN-β的表达量变化.结果:CpG刺激RAW264.7后,Rab7 mRNA表达水平逐渐增高,在8小时达到高峰,表达增高近4倍.Rab7过表达后,CpG刺激后产生的IL-6、IL-1β、IFN-β显著降低.巨噬细胞中Rab7失活突变后,在CpG刺激后IL-6、IL-1β、IFN-β的表达又显著增加.结论:CpG促进RAW264.7巨噬细胞中Rab7 mRNA的表达,Rab7抑制了CpG刺激的巨噬细胞中IL-6、IL-1β、IFN-β的表达,该抑制作用的发挥与其酶活性的GTP结合有关.该研究为进一步阐明Rab7在CpG/TLR9信号通路中的作用奠定了基础.
Rab7、CpG、Rab7T22N、RAW264.7细胞
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R392.11
国家自然科学基金30801001;内蒙古自治区自然科学基金项目2010MS0513,2011MS1112
2012-10-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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