HIV-1包膜蛋白ENV慢病毒载体的构建及表达

摘要：

目的 构建表达HIV-1包膜蛋白ENV的慢病毒载体,感染人胚肾细胞HEK293T,观察env基因在HEK293T中的表达.方法 通过点突变获得HIV-1 env完整基因,将env基因亚克隆至慢病毒穿梭载体pLVX-IRES-ZsGreen1的EcoRⅠ、XhoⅠ位点,构建重组质粒pLV-env,采用脂质体转染法转染HEK293T,经RT-PCR、Western blot检测目的基因表达,同时利用激光共聚焦技术对env基因的表达进行了定位.结果 成功获得了HIV-1 env基因,构建了重组慢病毒质粒pLV-env,RT-PCR、Western blot检测均表明外源基因能够表达,并具有抗原性,同时env基因表达后可以分泌到细胞膜表面膜上.结论 成功构建了含有HIV-1包膜蛋白env基因的重组慢病毒质粒,并验证了其表达,为下一步慢病毒的包装以及细胞模型和动物模型的构建奠定了基础.

关键词：ENV、HIV-1、慢病毒载体、真核表达

所属期刊栏目：28

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金81001342;973计划2011CB512110;吉林省自然科学基金201015116;吉林省高新技术产业发展项目2010;长春市科技特派员行动计划09KT04

在线出版日期：2012-06-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：440-443