小鼠CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞体外扩增

摘要：

目的:本研究旨在探讨CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞体外扩增的方法.方法:采用磁珠分选小鼠CD4+T细胞,αCD3单克隆抗体包被24孔板,加入αCD28单克隆抗体、雷帕霉素、rhIL-2,培养3周后,流式细胞仪测定培养细胞中CD4+CD25+T细胞的含量,实时定量PCR检测CD4+CD25+T细胞Foxp3 mRNA的表达;单向混合淋巴细胞反应和增殖抑制试验测定扩增的CD4+CD25+T细胞的增殖及其抑制功能;ELISA检测培养上清中IL-10和TGF-β1的含量.结果:小鼠CD4+T细胞培养3周后,CD4+CD25+T细胞达(76.05±2.73)%,高于未加雷帕霉素组(52.17±1.36)%(P＜0.001),磁珠分选的CD4+CD25+T细胞Foxp3 mRNA的表达是未加雷帕霉素组的5倍(P＜0.001),增殖能力是未加雷帕霉素组的0.29倍(P＜0.001),对CD4+T细胞增殖抑制能力是未加雷帕霉素组的3.6倍(P＜0.001),培养上清中IL-10和TGF-β1分别是对照组的1.8倍和1.6倍(P＜0.001).结论:小鼠CD4+T细胞在含有1 μg/ml的αCD28、rhIL-2 100 U/ml和终浓度为10 nmol/L雷帕霉素的培养体系中培养3周后能有效扩增CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞.

关键词：雷帕霉素、CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞、IL-10、TGF-β1

所属期刊栏目：28

分类号：R392.4

在线出版日期：2012-04-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：109-113