小鼠肺间质树突状细胞的分离、纯化与鉴定

摘要：

目的:建立肺间质树突状细胞(DCs)的分离与纯化方法,为肺间质DCs的相关研究提供实验基础.方法:雄性BALB/c小鼠肺组织经Ⅰ型胶原酶消化、密度梯度离心、CD11c+免疫磁珠分选纯化DCs,流式细胞术鉴定分选DCs纯度,倒置相差显微镜观察孵育细胞生长状态,扫描电镜和透射电镜观察DCs超微形态,流式细胞术检测肺间质DCs的CD11c、CD11b、CD86和I-Ab表型.结果:分选获得的肺间质DCs经鉴定,纯度为92.59%±5.62%,在RPMI1640培养基中生长状态良好,少数细胞形成小细胞集落.DCs超微形态观察显示细胞表面多见长1～2 μm密集的树枝状突起,细胞器不发达,细胞核形不规则.90%以上肺间质DCs为未成熟状态或前体DCs,低表达成熟标志物I-Ab和CD86,并具有异质性,近40%起源于髓系细胞分化.结论:密度梯度离心和免疫磁珠分选是分离、纯化肺间质DCs的理想方法,获得的DCs纯度高、活性好、免疫表型稳定,但操作步骤比较复杂,技术要求高.

关键词：肺、树突状细胞、免疫磁珠、CD11c

所属期刊栏目：27

分类号：R364.7(病理学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81000848

在线出版日期：2011-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：814-817,831