ZZ亲和肽在大肠杆菌中的表达及IgG抗体亲和活性测定

摘要：

目的:ZZ亲和肽是源于葡萄球菌蛋白A的人工合成序列,能结合IgG抗体Fc段,在免疫学领域具有广泛的应用价值.本研究利用大肠杆菌表达C端带有6×His标签的ZZ亲和肽,并测定其生物学活性.方法:以pEZZ18为模板PCR扩增ZZ亲和肽基因,克隆至pUC18载体的EcoRⅠ/Hind Ⅲ位点构建pUC-ZZ表达载体.利用大肠杆菌表达C端带有6×His的ZZ亲和肽,表达产物经Ni亲和层析纯化,利用竞争ELISA测定其与IgG抗体的亲和活性.结果:成功构建pUC-ZZ表达载体,SDS-PAGE显示ZZ亲和肽的Mr为16×103,与兔IgG抗体相对亲和常数为Ka≌1.45×108 L/mol.结论:ZZ亲和肽基因成功在大肠杆菌中表达,具有与IgG抗体结合活性,为ZZ亲和肽的进一步开发利用奠定了基础.

关键词：ZZ亲和肽、大肠杆菌、表达、活性测定

所属期刊栏目：27

分类号：Q591.2

资助基金：山东省科技攻关计划项目2008GG10002022

在线出版日期：2011-07-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：545-547