人源化Fab段噬菌体抗体库的构建及初步鉴定

摘要：

目的:构建人天然Fab段噬菌体抗体库,为人源抗体的制备建立技术平台.方法:从正常健康人的外周血淋巴细胞中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增人抗体轻链和重链Fd段基因,构建噬菌体抗体库,酶切鉴定有无插入片段并测序分析,用IL-2和地高辛进行富集筛选.结果:最终构建的抗体库库容约为8.4×107,酶切鉴定显示有插入片段,抗体库重组率是70%,DNA测序分析证实抗体重链属IgG亚类,轻链为λ链.用IL-2和地高辛进行三轮筛选,抗体库均得到了不同程度的富集.结论:成功构建了一个天然的人源化噬菌体抗体库,可用于下一步胰淀素人源化抗体的筛选、纯化和表达.

关键词：噬菌体抗体库、抗体Fab段、人源化抗体

所属期刊栏目：26

分类号：R446.62(诊断学)

资助基金：天津市自然科学基金资助项目05YFMGCO4000

在线出版日期：2010-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：646-650