SUMO融合系统表达人白细胞介素17及其活性的研究

摘要：

目的:克隆、表达和纯化人白细胞介素17(hIL-17),并对其生物学活性进行研究.方法:采用RT-PCR的方法从活化的人T细胞中克隆获得hIL-17 cDNA.构建了含羟胺切割位点的重组载体pHisSUMO-hIL-17,导入宿主菌Rosetta中,经IPTG诱导后得到表达.用Ni-NTA琼脂糖颗粒层析纯化融合蛋白,经羟胺切割,复性,通过Western blot实验进行确认,并从核酸水平和蛋白水平鉴定其活性.结果:克隆表达出了hIL-17,利用Ni-NTA琼脂糖颗粒层析纯化得到的纯品蛋白经体外活性实验表明,该蛋白具有刺激3T3-L1细胞和HeLa细胞分泌IL-6、IL-8、G-CSF的作用.结论:制备了具有生物学活性的成熟hIL-17蛋白,为进一步研究该分子在疾病中的作用奠定了基础.

关键词：hIL-17、表达、纯化、活性试验

所属期刊栏目：26

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：哈尔滨市科技创新人才发展计划2006RFXXS002;东北农业大学创新团队发展计划资助

在线出版日期：2010-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：595-600,605