重组人胸腺素β16的表达、纯化及其生物学活性研究

摘要：

目的:人工合成人胸腺素β16(Thymosin β16,Tβ16)的DNA序列,克隆到大肠杆菌蛋白表达载体pET3c中,获得了高表达菌株.经发酵、破菌、层析纯化、酶切后获得了Tβ16表达产物,并研究其体内外生物学活性.方法:将构建的重组His-SUMO-Tβ16融合蛋白的表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达.表达的融合蛋白经超声破碎、离子交换和金属亲和层析进行纯化后,用His-SUMO蛋白酶酶切,再经金属亲和层析和Superdex 30凝胶层析,获得胸腺素β16.对胸腺素β16进行体内外生物学活性研究.结果:重组His-SUMO-Tβ16融合蛋白为可溶性表达,Tβ16比活性为5.3×105 U/mg,在体外可促进BALB/c 3T3细胞增殖,促进兔角膜细胞的增殖,促进血管内皮细胞的增殖和迁移以及促进鸡胚绒毛膜血管的增殖;在体内可促进家兔碱烧伤皮肤愈合.结论:成功构建了重组His-SUMO-Tβ16融合蛋白的大肠杆菌表达载体,获得了重组Tβ16蛋白,其具有很好的修复作用,为进一步Tβ16产业化开发奠定了基础.

关键词：胸腺素β16、表达、纯化、创伤修复

所属期刊栏目：25

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2009-05-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：306-311,320