鸡MxA基因的克隆、表达及生物学活性检测

摘要：

目的:克隆鸡MxA基因,构建其原核表达质粒,并诱导其在大肠杆菌中表达融合蛋白.方法:采用RT-PCR方法从鸡成纤维细胞(CEF)中扩增MxA,将其克隆至克隆载体pMD18-T中,筛选阳性克隆后回收目的片段,将其克隆入原核表达质粒pGEX-6p-1,构建其重组表达质粒pGEX-MxA,以IPTG诱导表达,经SDS-PAGE、鸡胚新城疫病毒干扰试验和VSV-CEF微量细胞抑制试验进行分析、鉴定.结果:经RT-PCR扩增获得的MxA序列与GeneBank报道的序列一致,SDS-PAGE和干扰试验证实重组质粒可以表达出相应分子量为45 000的蛋白,与GST-MxA融合蛋白分子量一致.结论:成功完成了鸡MxA基因的克隆及其原核表达质粒的构建,在大肠杆菌DH5α中经IPTG诱导表达了融合蛋白GST-MxA,为进一步探讨MxA的生物学活性,探索抗病毒药物的研发奠定了基础.

关键词：鸡MxA基因、基因克隆、原核表达、生物活性

所属期刊栏目：22

分类号：Q81(生物工程学(生物技术))

资助基金：山东农业大学校科研和教改项目

在线出版日期：2006-12-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1018-1020,1024