重组人ω-干扰素的制备及活性分析

摘要：

目的:建立人ω-干扰素(hIFN-ω)的大肠杆菌表达系统,为人ω-干扰素的生产及临床应用奠定基础.方法:自抗凝血中提取人基因组DNA,PCR扩增人ω-干扰素成熟肽编码序列克隆入pGEM-T-easy载体,进一步构建表达型重组质粒pBV-IFN-ω,温度诱导表达,表达产物行SDS-PAGE及Western blot鉴定.溶解并复性包涵体,细胞病变抑制法测定表达产物的抗病毒活性.结果:DNA序列分析证实,重组质粒pBV-IFN-ω含有开放读码框架正确的人ω-干扰素成熟肽编码序列.SDS-PAGE显示,诱导表达碎菌后的沉淀中有大小约为20 kD的外源蛋白,Western blot证明此外源蛋白为重组人ω-干扰素,并经体外活性测定证实有良好的抗病毒活性.结论:成功地构建了人ω-干扰素(IFN-ω)的大肠杆菌表达系统,表达出具有抗病毒活性的重组人ω-干扰素.

关键词：人ω-干扰素、大肠杆菌、表达、活性

所属期刊栏目：22

分类号：R392

资助基金：教育部防治非典科技攻关项目JSARS-2003-19

在线出版日期：2006-11-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：940-943