DNA免疫法研制抗猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白中和性单克隆抗体
目的:研制抗PRRSV M蛋白的单克隆抗体(McAb),以期获得中和性单克隆抗体.方法:将PRRSV M蛋白的基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1,利用构建成的重组真核质粒免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗PRRSV M蛋白的单抗,建立间接ELISA方法筛选阳性克隆.利用试剂盒检测Ig亚类.通过免疫印迹(Westem blot)、间接免疫荧光试验(IFA)鉴定McAb的特异性.间接ELISA和病毒中和试验检测杂交瘤细胞上清McAb效价和腹水McAb效价.结果:获得3株可分泌特异性抗PRRSV M蛋白抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1A7、4G3、5F3.1A7和4G3的Ig亚类为IgM.ELISA检测杂交瘤细胞培养上清效价为1:64～1:1 024,腹水效价为1:3 200～1:10240.同时用Western blot、IFA检测,结果均是阳性.4G3和1A7相对亲和力不同,证明其识别不同抗原位点.1A7和4G3具有病毒中和活性,中和效价达到1:96.结论:获得2株特异性抗PRRSV M蛋白的中和性单抗,为PRRSV诊断和免疫预防研究奠定了重要基础.
猪繁殖与呼吸综合征病毒、单克隆抗体、M蛋白、质粒、中和抗体
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S851(动物医学（兽医学）)
国家自然科学基金30471288;30270990;新世纪优秀人才支持计划NCET-04-0502;江苏省自然科学基金BK2005093;高等学校博士学科点专项科研项目20030307012
2006-11-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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