siRNA对Hela细胞表达VEGF的干涉作用

摘要：

目的:研究体外转录合成的siRNA对Hela细胞中VEGF表达的干涉作用.方法:根据人VEGF 1～5外显子序列进行siRNA设计,应用T7 RNA聚合酶体外转录合成3条siRNA.并利用siPORT Lipid将siRNA转染入Hela细胞中,通过半定量RT-PCR和免疫荧光方法检测Hela细胞VEGF表达情况,评价不同序列siRNA对VEGF基因表达的干涉作用.结果:体外转录合成的3条siRNA均能高效地抑制Hela细胞中VEGF的表达,干涉效率分别为88.7%、94.2%和80.3%,而1个错配碱基的siRNA及ssRNA(+)未显现明显干涉作用.另外实验显示在5～10 pmol范围内,T7-siRNA对VEGF表达的抑制作用具有剂量依赖性.结论:利用T7 RNA聚合酶体外转录合成的siRNA可以高效干涉Hela细胞中VEGF的表达且具有良好的序列特异性,为肿瘤的基因治疗提供了新方法.

关键词：RNA干涉、T7 RNA聚合酶、血管内皮生长因子、Hela细胞

所属期刊栏目：22

分类号：R733(肿瘤学)

在线出版日期：2006-09-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：700-704