p38及PI3K在结核杆菌抗原再刺激诱导人γδT细胞凋亡信号转导中的作用

摘要：

目的:建立结核杆菌抗原(Mtb-Ag)再刺激活化的人γδT细胞凋亡模型;应用信号分子阻断剂观察p38及PI3K信号传导途径在Mtb-Ag再刺激诱导γδT细胞凋亡中的作用.方法:用3种浓度Mtb-Ag分别再刺激培养15～25天的Mtb-Ag激活的人T细胞(MtbAT)24小时后,应用Annexin-V-FITC/PI染色流式细胞术(FCM)检测γδT细胞凋亡;用Mtb-Ag(10.0 μg/ml)分别再刺激MtbAT 3、6、12和24小时后,观察γδT细胞凋亡情况;预先用SB203580(p38途径抑制剂)及LY294002(PI3K途径抑制剂)分别处理MtbAT 60分钟,观察Mtb-Ag(10.0 μg/ml)再刺激3小时后γδT细胞凋亡情况.结果:与对照组相比,10.0和20.0 μg/ml MtbAg均显著诱导γδT细胞凋亡(P＜0.01),凋亡细胞比例分别增加35.63%及38.83%,且此二种浓度MtbAg在诱导γδT细胞凋亡方面无显著性差异(P＞0.05);与对照组相比,10.0 μg/ml Mtb-Ag再刺激MtbAT 3、6、12和24小时均可显著诱导γδT细胞凋亡(P＜0.01),凋亡细胞比例在44.21%～51.76%之间;且Mtb-Ag再刺激MtbAT 3小时实验组与再刺激MtbAT 24小时实验组相比,在诱导γδT细胞凋亡方面无显著性差异(P＞0.05),后者的凋亡细胞比例仅比前者增加7.55%;Mtb-Ag再刺激诱导γδT细胞凋亡可被SB203580(80.0 μmol/L)及LY294002(10.0 μmol/L)抑制,凋亡抑制率分别为91.6%及43.1%.结论:采用Mtb-Ag(10.0 μg/ml)再刺激活化的γδT细胞3小时的方法,可建立Mtb-Ag再刺激活化的人γδT 细胞凋亡模型;信号分子阻断剂的实验证明,p38途径及PI3K途径均参与了Mtb-Ag再刺激已活化γδT细胞凋亡过程.

关键词：γδT细胞、结核杆菌、细胞凋亡、信号转导

所属期刊栏目：22

分类号：R329.25(人体形态学)

资助基金：中国科学院资助项目30070721;安徽省高校自然科学基金2005KJ3752C

在线出版日期：2006-04-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：203-206,211