抗溶藻弧菌独特型单克隆抗体单链抗体ScFv的构建和表达

摘要：

目的:克隆抗溶藻弧菌独特型单克隆抗体ScFv.方法:从分泌抗溶藻弧菌独特型单克隆抗体的杂交瘤细胞株(2F4)中提取总RNA,利用RT-PCR技术,克隆该抗体重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL),通过基因重组构建VH-VL的表达载体pTAT-AL1,转化大肠杆菌BL21后用IPTG诱导表达.结果:VH基因序列全长369碱基对,编码123个氨基酸,VL基因序列全长339碱基对,编码113个氨基酸,二者均符合小鼠免疫球蛋白可变区基因特征,含有4个框架区(FRs)、3个抗原互补决定区(CDRs)及抗体特征性的两个半胱氨酸残基.ELISA测定显示基因工程抗体ScFv与原代抗体一样,具有较高的抗原亲和力.结论:成功构建了抗溶藻弧菌独特型抗体ScFv基因并表达于细菌壁膜间隙和包涵体中,为溶藻弧菌独特型抗体单链抗体ScFv成为新一代基因工程疫苗奠定了初步基础.

关键词：溶藻弧菌、单链抗体、基因工程疫苗

所属期刊栏目：21

分类号：Q812.3(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2001AA622040

在线出版日期：2005-11-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：735-738