抗vWF与GPIb-IX结合部位的噬菌体呈现型单链抗体制备及功能研究

摘要：

目的:为了研制新型特异性抗血栓制剂.方法:利用噬菌体展示文库技术筛选与vWF-A1区有高亲合力单链抗体(ScFv);基因重组的方法构建高效表达载体pET-20b(+)-ScFv,在大肠杆菌中诱导表达;夹心ELISA方法鉴定此单抗的抗原结合活性;瑞斯脱霉素诱导的血小板聚集试验(RIPA)测定ScFv对血小板聚集的抑制作用.结果:噬菌体展示技术筛选的ScFv在大肠杆菌中成功地诱导表达,表达的ScFv占菌体总蛋白的41%,以包涵体形式存在;经纯化复性的ScFv可以与vWF、rvWF-A1、rvWF-A1/A3结合,但不与rvWF-A3、BSA反应;ScFv具有抑制RIPA功能,抑制率为73.7%.结论:在大肠杆菌中高效表达的噬菌体展示技术筛选的抗vWF-A1区ScFv可特异性与vWF-A1区结合,而抑制瑞斯脱霉素诱导的血小板聚集,显示出很好的应用前景,为研制新型抗栓药物奠定基础.

关键词：vWF、血栓、抗体/ScFv、表达

所属期刊栏目：21

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：中国科学院资助项目30070322

在线出版日期：2005-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：308-311,314