HLA-C基因真核细胞表达载体的构建、鉴定及表达

摘要：

目的:构建人白细胞抗原(RLA-C)基因真核细胞表达载体,在JAR细胞表面表达,并对其功能进行探讨.方法:用RT-PCR从人外周血淋巴细胞的总mRNA中逆转录扩增HLA-C的cDNA,克隆到PBluescript SD+/-噬菌粒中;测序鉴定后,定向亚克隆到真核细胞表达载体pcDNA3中.经脂质体转染JAR细胞,G418筛选阳性克隆,FACS检测RLA-C分子的表达.转染HLA-C分子的JAR细胞再与分离的NK细胞进行细胞毒试验.结果:限制性内切酶酶切和序列分析表明,克隆到真核细胞表达载体pcDNA3中的HLA-C等位基因是HLA-Cw*0602,该分子在JAR细胞株获得高效表达.直接分离的PBL细胞对JAR细胞以及表达HLA-C分子的JAR细胞无细胞毒作用;而IL-2活化的NK细胞对这些细胞都有细胞毒作用.结论:RLA-C基因的成功表达为研究HLA-C分子与NK细胞受体((KIR)之间的关系奠定了基础,NK细胞对JAR细胞的杀伤可能存在不依赖HLA-C分子的机制.

关键词：HLA RT-PCR、基因克隆、基因表达

所属期刊栏目：18

分类号：R394

资助基金：国家自然科学基金30070784

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：772-775