人可溶性TNF受体(sTNFRI)在大肠杆菌中的表达及其活性鉴定

摘要：

目的:构建人可溶性TNF受体I(sTNFRI)基因表达载体,并在大肠杆菌中高效表达.方法:用RT-PCR扩增编码人TNFRI胞外段基因片段,将其插入到表达载体pET-28a,并转入大肠杆菌进行表达.结果:在IPTG诱导下,转入外源基因的大肠杆菌BL-21可高效表达sTNFRI蛋白,SDS-PAGE显示在27 KD处有一特异表达条带,其表达量占菌体蛋白总量的31%.纯化的sTNFRI可有效封闭TNF对L929细胞的胞毒效应;间接免疫荧光显示它可特异性抑制TNF与靶细胞TNFR的结合.结论:通过基因工程技术获得了人sTNFRI重组蛋白.

关键词：可溶性TNF受体、基因表达、胞毒效应

所属期刊栏目：18

分类号：R392.11

资助基金：国家自然科学基金39870713,39270314

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：743-746