GST-人可溶性成纤维细胞生长因子受体1融合蛋白在酵母细胞中的表达及活性测定

摘要：

目的:表达重组人可溶性成纤维细胞生长因子受体1(solublefibroblast growth factor receptorl,sFGFR1),研究其对成纤维细胞生长因子(FGF)生物学活性的拮抗作用.方法:采用逆转录-PCR(FT-PCR)技术自人肺成纤维细胞获得sFGFR1 cDNA,测序确证后,将其克隆入酵母细胞表达载体pYEX4T-1;重组质粒转化入酵母细胞(DY150)中进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE及Westerm blot鉴定.利用NIH3T3细胞增殖抑制实验检测重组人sFGFR1的生物学活性.结果:经CuS04诱导,酵母细胞表达出重组谷胱苷肽转移酶(GST)-sFGFR1融合蛋白,此蛋白在凝胶上表现为1条约60 KD 的阳性区带,在Western blot实验中可被GST特异性抗体识别.重组GST-sFGFR1融合蛋白的粗提物在体外能够拮抗FGF介导的促NIH3T3细胞增殖的活性.结论:重组GST-sFGFR1融合蛋白在酵母表达系统中得到有效表达,并具有很好的生物活性.

关键词：可溶性成纤维细胞生长因子受体1、酵母表达系统、表达

所属期刊栏目：18

分类号：R392-33

资助基金：香港裘槎基金1955-1998

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：233-235