中国人共刺激信号抑制配体表达载体的构建及在大肠杆菌DH5α中的表达

摘要：

目的:构建CTLA-4基因表达载体并在大肠杆菌DH5α中表达CTLA-4蛋白.方法:用PCR方法获得中国人CTLA-4基因第二外显子,构建重组表达质粒pPBCTLA,转化大肠杆菌DH5α,以PCR和RFLP方法筛选阳性克隆,以免疫印迹技术检测表达产物.结果: 阳性重组子在DH5α中经温度诱导可表达CTLA-4蛋白,分子量与理论值相符(约12 kD).进一步分析表明, CTLA-4蛋白主要以包涵体形式存在.Western-blot 结果证实,12 kD的表达条带可与标准羊抗人CTLA-4 IgG起特异反应.淋巴细胞转化实验结果表明该蛋白具有明显的免疫抑制作用.结论:用基因工程技术获得中国人CTLA-4基因表达蛋白,为进一步研究CTLA-4的生物学功能及研制抗CTLA-4抗体奠定了基础.

关键词：CTLA-4、基因表达、淋巴细胞转化实验

所属期刊栏目：17

分类号：R392

资助基金：国家自然科学基金;上海市科委资助项目

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：559-562