抗TNF-α人-鼠嵌合抗体的构建及表达
目的:构建和表达抗TNF-α人-鼠嵌合抗体。方法:将抗TNF-α鼠单抗Z8的轻、重链可变区基因插入到含有人k链和IgG1重链恒定区基因的真核细胞表达载体中,分别构建轻、重链分开表达和共同表达的人-鼠嵌合抗体真核表达载体,转染真核细胞,通过ELISA、RT-PCR、免疫印迹检测TNF-α的活性。用L929细胞检测嵌合抗体体外中和TNF-α的活性。结果:ELISA鉴定结果表明该嵌合抗体与TNF-α特异性结合;PF-PCR结果显示转染后细胞系有人-鼠嵌合抗体mRNA的转录;免疫印迹结果证实有人IgG蛋白的表达;体外中和实验证明此嵌合抗体能中和TNF-α对L929细胞的毒性。结论:构建的真核表达载体获得了功能性表达。
TNF-α、人-鼠嵌合抗体、表达
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R392
国家高技术研究发展计划863计划863-102-09-01
2007-08-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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491-494