人白细胞介素-3突变体的构建及在大肠杆菌中表达的研究

摘要：

目的:为了在大肠杆菌中高效表达hIL-3cDNA,获得hIL-3蛋白,拟对天然型hIL-3进行构建以获得新的突变体,同时进行了活性测定,以便深入了解hIL-3的结构与功能之间的关系.方法:利用PCR技术对天然型hIL-3 N末端第3位蛋氨酸(Met3)和C末端第17位蛋氨酸(Lys116)进行定点突变,获得突变体MhIL-3和MVhIL-3.结果:经Suger双脱氧法测序证实突变体 MhIL-3 cDNA,MVhIL-3 cDNA 的活性为6.9×104 U/ml,而天然型的是1.5×104 U/ml.天然型pSM53hNIL-3表达量占菌体总蛋白的7%,突变型pSM53MVhIL-3表达量占菌体总蛋白的16%.结论:人IL-3 cDNA可通过PCR技术进行定点突变,所获得的突变型pSM53 MVhIL-3活性比天然型pSM53hIL-3高3～4倍.

关键词：PCR定点突变、hIL-3、cDNA突变体、高水平表达、hIL-3突变体

所属期刊栏目：15

分类号：R392.11

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：16-19