白纹伊蚊胰岛素样肽基因的鉴定和时空表达分析

摘要：

目的 筛选并鉴定白纹伊蚊全基因组中的胰岛素样肽(insulin-like peptides,ILP)基因,分析其基因结构以及在不同发育时期和不同组织的表达谱.方法 基于埃及伊蚊ILPs家族成员序列,在Vectorbase网站上的白纹伊蚊全基因组数据库做同源搜索,SignalP 6.0进行信号肽预测,MEGA 11.0软件包对ILPs基因结构特点进行分析,最大似然法构建系统进化树.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测不同发育时期(卵、4龄幼虫、蛹、成蚊),以及吸血前后雌蚊不同组织(头部、脂肪体、中肠、胸部、卵巢)的白纹伊蚊胰岛素样肽(insulin-like peptides of Aedes albopictus,AalbILPs)基因表达变化.采用SPSS 20.0软件做数据统计分析,Tukey's HSD检验和t检验分析不同发育时期和吸血前后不同组织中AalbILPs基因的表达差异.结果 在白纹伊蚊全基因组中获得7条ILPs开放阅读框序列.7条AalbILPs序列均具有胰岛素超家族的保守特征,由连续的信号肽、B、C和A链组成前肽.其中AalbILP6具有截短的C链和羧基末端延伸,类似脊椎动物的胰岛素生长因子.系统进化树显示,AalbILP1、2、3和5在蚊虫中最为保守,AalbILP6其次,而AalbILP4、7为伊蚊所特有.qRT-PCR结果显示,AalbILP1、2、3和5在不同发育阶段均有表达.AalbILP5在雄蚊中相对表达量为1.358 3±0.576 9,与其他发育阶段和雌蚊相比最高(q卵=6.572,q幼虫=5.771,q蛹=5.409,q 雌蚊=3.115,均P＜0.05).AalbILP3和4在成蚊头部特异性表达,AalbILP6主要在雌蚊卵巢表达;AalbILP7为假基因,未转录.与未吸血蚊虫相比,吸血诱导AalbILP3和4在雌蚊头部的表达分别上调2.60和1.68倍(tAalbILP3-头部=9.596,PAalbILP3-头部＜0.001;tAalbILP4-头部=4.524,PAalbILP4-头部=0.001);AalbILP1在头部、脂肪体以及中肠的表达分别上调10.33、6.07和3.79倍(t头部=4.255,P头部=0.001;t脂肪体=4.305,P脂肪体=0.001;t中肠=10.480,P中肠＜0.001),胸部和卵巢的表达分别下调4.24和2.17倍(t胸部=7.922,P胸部＜0.001;t卵巢=3.752,P卵巢=0.003);AalbILP6在雌蚊中肠和卵巢的相对表达量分别上调11.91和2.16倍(t中肠=5.799,P中肠＜0.001;t卵巢=9.074,P卵巢＜0.001).结论 在白纹伊蚊全基因组中共获得6条ILPs序列,并成功构建其时空表达谱.

关键词：白纹伊蚊、胰岛素样肽、时空表达、血餐

所属期刊栏目：34

分类号：R384.1(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金81760374

在线出版日期：2023-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：204-211