10.11853/j.issn.1003.8280.2021.04.023
云南省芒市采集蠓中辛德毕斯病毒的分离与鉴定
目的 了解云南省德宏傣族景颇族自治州(德宏州)芒市蠓携带虫媒病毒情况,为虫媒病毒的研究和防控提供科学依据.方法 2013年7月在德宏州芒市郊区牛和羊的养殖场中采用灯诱方法收集蠓标本.对采集到的蠓进行研磨离心,上清分别接种金黄地鼠肾细胞(BHK-21)和白纹伊蚊细胞(C6/36)进行病毒分离.阳性分离物分别采用甲病毒属、黄病毒属和布尼亚病毒属特异引物进行初步鉴定;采用辛德毕斯病毒(SINV)NS1基因特异性引物对阳性分离物进行反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增并进行测序及序列分析.结果 共采集到4 500余只蠓,分44批进行病毒分离,获得1株阳性分离物(编号:YN222)接种在BHK-21细胞24 h后迅速产生明显细胞病变,接种在C6/36细胞72h后产生明显的细胞病变.甲病毒属引物RT-PCR扩增阳性,而黄病毒属和布尼亚病毒属引物扩增均为阴性.甲病毒属引物扩增阳性产物测序后BLAST结果显示YN222株分离物与MRE16株SINV核苷酸同源性最高为93.7%.采用MRE16株NS1基因特异性引物进行RT-PCR扩增结果为阳性,测序获得1 605 nt序列.系统进化分析结果显示,蠓新分离病毒YN222与澳大利亚东方型SINV位于同一进化分支内,核苷酸和氨基酸同源性较高,核苷酸在93.7%~99.6%,氨基酸为99.4%.结论 在云南省德宏州采集蠓中分离的病毒YN222为澳大利亚东方型SINV,这是首次在蠓中分离到SINV.
辛德毕斯病毒;蠓;分离;鉴定;系统进化分析
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R373.3(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家自然科学基金;云南省科技厅重点基金;云南省程功专家工作站;云南省科技人才和平台计划项目;公益性行业农业科研专项资助项目;云南省畜牧兽医科学院基础研究项目
2021-09-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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