云南省瑞丽市白纹伊蚊对拟除虫菊酯类杀虫剂抗性种群的电压门控钠离子通道基因突变分析

摘要：

目的 检测云南省瑞丽市白纹伊蚊对氯菊酯、溴氰菊酯和顺式氯氰菊酯杀虫剂抗性种群和敏感种群的击倒抗性(kdr)基因突变,阐明抗性表型与kdr基因突变的关系.方法 2016年6-9月收集瑞丽市白纹伊蚊成蚊对氯菊酯、溴氰菊酯和顺式氯氰菊酯抗药性生物测定的蚊虫样本,江苏白纹伊蚊实验室敏感品系种群,单蚊提取基因组DNA,合成3对引物,PCR扩增神经细胞膜上电压门控钠离子通道(VGSC)部分基因片段,检测kdr基因突变情况.统计抗性和敏感种群kdr突变的基因型和基因频率.采用x2检验,分析kdr基因突变与抗性表型的相关性.结果 共获得500条kdr基因片段,其中瑞丽市白纹伊蚊抗性种群kdr基因片段440条,江苏敏感品系种群kdr基因片段60条.敏感种群kdr基因片段各位点均未发生突变.瑞丽市白纹伊蚊抗性种群kdr基因在1532、1534和1763位点存在突变.1份样本同时存在F1534S和I1532T突变.1532位点共有2种等位基因,即野生型ATC/I(异亮氨酸)和突变型ACC/T(苏氨酸),频率分别为99.32％ (292/294)和0.68％ (2/294);3种基因型,即野生型纯合子I/I、野生/突变型杂合子I/T和突变型纯合子T/T,频率分别为98.64％(145/147)、1.36％(2/147)和0(0/147);1534位点共有5种等位基因,即野生型TTC/F(苯丙氨酸),突变型TCC/S(丝氨酸)、TCG/S(丝氨酸)、TTG/L(亮氨酸)和TGC/C(半胱氨酸),频率分别为59.53％ (175/294)、29.93％ (88/294)、0.68％(2/294)、2.72％ (8/294)和7.14％(21/294);6种基因型,即野生型纯合子F/F、野生型/突变型杂合子F/C、F/S、F/L、突变型纯合子S/S和突变型杂合子C/S,频率分别为40.14％(59/147)、6.80％(10/147)、26.53％(39/147)、5.44％(8/147)、13.61％(20/147)和7.48％(11/147);1763位点共有2种等位基因,即野生型GAC/D(天冬氨酸)和突变型TAC/Y(酪氨酸),频率分别为99.32％ (292/294)和0.68％(2/294);3种基因型,即野生型纯合子D/D、野生型/突变型杂合子D/Y和突变型纯合子Y/Y,频率分别为98.64％(145/147)、1.36％ (2/147)和0(0/147).结论 瑞丽市对拟除虫菊酯类杀虫剂产生抗性的白纹伊蚊种群中,发现有1532、1534和1763位点存在突变,未发现989和1014等位点的突变,其中以1534位点的突变为主,首次发现了1763位点突变.突变以单一突变为主,仅l份样本同时存在F1534S和I1532T突变.该研究证实了kdr机制是云南省瑞丽市白纹伊蚊对拟除虫菊酯类杀虫剂产生抗性的机制之一.

关键词：瑞丽市、白纹伊蚊、拟除虫菊酯类杀虫剂、电压门控钠离子通道、基因突变

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分类号：R384.1;S481+.4(医学寄生虫学)

资助基金：国家重点研发计划2016YFC1200500;国家自然科学基金U1602223;云南省生物医药重大专项2017ZF007

在线出版日期：2019-05-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：158-162