巢式PCR和实时荧光定量PCR在莱姆病宿主动物监测中的应用评价

摘要：

目的 应用巢式PCR和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测啮齿动物中伯氏疏螺旋体的带菌率,对2种方法在莱姆病宿主动物监测中的应用效果进行评价.方法 2017年7-9月,在新疆维吾尔自治区(新疆)古尔图地区野外放置鼠夹,采集啮齿动物,并鉴别种类;采用巢式PCR和qRT-PCR 2种方法检测标本携带伯氏疏螺旋体情况,并对2种方法的检测结果进行统计学分析.对巢式PCR检测的阳性标本进行测序和序列比对分析,以初步确定伯氏疏螺旋体的基因型别.结果 共检测啮齿动物标本134份,巢式PCR和qRT-PCR检测阳性率分别为13.43％和12.69％,差异无统计学意义(x2=0.000,P=1.000);阳性标本均为长尾黄鼠,总阳性率为20.15％,其中8份标本经2种方法检测结果均为阳性;10份巢式PCR检测为阳性的标本经qRT-PCR检测为阴性,9份qRT-PCR检测为阳性的标本经巢式PCR检测为阴性.采用qRT-PCR方法共检出伯氏疏螺旋体阳性17份,阳性样本Ct值为33.49～37.89.结论 2种方法均可用于啮齿动物的伯氏疏螺旋体检测,同时使用2种方法可提高伯氏疏螺旋体的检出率.巢式PCR方法检测可以了解新疆古尔图地区啮齿动物感染伯氏疏螺旋体的基因型别;而qRT-PCR方法则可对标本中的细菌载量进行定量分析.

关键词：伯氏疏螺旋体、啮齿动物、巢式聚合酶链式反应、实时荧光定量聚合酶链式反应

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分类号：R377(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：十三五科技重大专项2017ZX10303404-006-003;病原监测能力建设项目131031102000150003

在线出版日期：2018-11-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：425-427